Jun 26, 2025

Recuperación de antígeno para IHQ

DOI
https://dx.doi.org/10.17504/protocols.io.eq2lyqmqpvx9/v1
Recuperación de antígeno para IHQ
  • Cristian Ramón Hernández1
  • 1None
Cristian CRH Hernández
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DOI: https://dx.doi.org/10.17504/protocols.io.eq2lyqmqpvx9/v1
Protocol Citation: Cristian Ramón Hernández 2025. Recuperación de antígeno para IHQ. protocols.io https://dx.doi.org/10.17504/protocols.io.eq2lyqmqpvx9/v1
License: This is an open access  protocol  distributed under the terms of the  Creative Commons Attribution License,  which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited
Protocol status: Working
We use this protocol and it's working
Created: June 24, 2025
Last Modified: June 26, 2025
Protocol  Integer ID: 220971
Keywords: antígeno, IHC, immunohistochemistry, retrieval, antígeno para ihq protocol for antigen recovery, antígeno para ihq protocol, antigen recovery for immunohistochemistry assay, paraformaldehyde product of ihc fixation, antigen recovery, ihc fixation, antigen, indirect immunohistochemistry, immunohistochemistry assay, paraformaldehyde product, antibody, protocol, recovery
Abstract
Protocol for antigen recovery which has been hidden by formalin or paraformaldehyde product of IHC fixation. Once applied, antigens should bind better to the antibodies for direct and indirect immunohistochemistry assays.

Antigen recovery for immunohistochemistry assay.
Guidelines
No se requiere técnica aséptica, salvo al incubar la muestra PIER en caso de que sea una incubadora de experimentos biológicos que así lo requiera
Materials
Buffer HIER:
Citrato de sodio pH 6

Buffer de disociación:
1 mL Cloruro de calcio 1 %
1 mL Tripsina 0.5 %
8 mL agua destilada

Safety warnings
Cuidado al manejar las muestras calientes recién sacadas de la olla a presión o autoclave
Before start
Realizar si el protocolo de la inmunohistotinción no resulta producto de obstrucción con el agente fijador
Proceso de recuperación de antígeno
20m
Si al teñir usando paraformaldehído como fijador al final no se aprecia la señal requerida pese a que el anticuerpo haya sido validado se tendrá que hacer el proceso de recuperación de antígeno.
Determinar cuál proceso es apropiado para el constructo, si por calor o por disociación enzimática
Step case

Recuperación de antígeno por calor
From 3 to 4 steps

Cuando el constructo requiere recuperación de antígeno y puede ser sometido a temperaturas mayores de 90° grados
Determinar qué método se puede utilizar para la muestra

Step case

HIER por microondas
3 steps

Cuando el método de aplicar calor puede ser un microondas
En un recipiente apto para microondas, sumergir las muestras en citrato de sodio 6

4m
Aplicar la potencia máxima hasta que el líquido empiece a hervir
3m
Hervir durante 00:20:00

20m